ITEST STAFY- KOAGULÁZA
Význam a použití:
Souprava ITEST STAFY-KOAGULÁZA slouží k určení plazmakoaguláza - pozitivních stafylokoků. Vedle druhu Staphylococcus aureus jde o skupinu dalších pěti druhů rodu Staphylococcus, vyskytující se hlavně ve veterinárním materiálu - S. intermedius, S. hyicus, S. delphini, S. schleiferi subsp. coagulans, S. aureus subsp. anaerobius.
Ostatní popsané druhy, tzn. do S. pasteuri (identifikovaný v roce 1993), mají tento test negativní.
Provedení testu:
1. Do lahvičky s lyofilizovanou králičí plazmou přidejte 8 ml přiloženého fyziologického roztoku a obsah důkladně rozpusťte.
2. Do aglutinační zkumavky dejte 0,5 ml roztoku plazmy a přidejte buď 0,1 ml osmnáctihodinové bujónové kultury, nebo několik kolonií testovaného kmene a směs dobře promíchejte.
3. Směs inkubujte 3 hod při 37 + 1°C a pak do druhého dne při laboratorní teplotě.
Hodnocení:
Výsledek odečítejte po 1, 3 a 24 hodinách. V případě pozitivní reakce dojde ke ztuhnutí plazmy nebo k vytvoření chuchvalců či sraženin.
Poznámka:
Roztok plazmy lze také použít ke stanovení tzv. vázané koagulázy: Na podložním sklíčku resuspendujte v kapce připravené plazmy několik kolonií testovaného kmene. U kmenů S. aureus a částečně u kmenů S. intermedius by mělo dojít k aglutinaci. Toto stanovení však vykazuje až 25% falešnou negativitu. Proto u kmenů s negativní sklíčkovou aglutinací musíte provést test zkumavkový.
Slabou pozitivní reakci na vázanou koagulázu mohou někdy vykazovat i dva druhy koaguláza-negativních stafylokoků uplatňující se také jako původci infekcí u lidí: S. lugdunensis a S. schleiferi subsp. schleiferi.
Doporučení:
Pro kontrolu kvality diagnostické soupravy ITEST STAFY - KOAGULÁZA doporučujeme použít jako pozitivní kontrolu kmen Staphylococcus aureus CCM 3953, jako negativní kontrolu kmen Staphylococcus epidermidis CCM 4418. Oba kmeny dodává Česká sbírka mikroorganismů, Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity, Tvrdého 14, 602 00 Brno.
Upozornění:
1. Souprava ITEST STAFY - KOAGULÁZA je dodávána v balení po 4x8 ml (kat. č. SO 311) a je určena pouze pro použití in vitro.
2. Soupravu uchovávejte při 2 – 8°C a spotřebujte do doby exspirace uvedené na štítku. Rozpuštěnou plazmu spotřebujte do 5 dnů.
3. Při poškození primárního obalu IVD nepoužívejte a kontaktujte výrobce.
4. Nespotřebovaný IVD a prázdný obal likvidujte v souladu se zákonem o odpadech č. 185/2001 Sb.