ITEST ENTERO 3H
Princip:
Testy využívají rozdílnou schopnost enterobakterií rychle využívat různé enzymatické substráty. Utilizace substrátů se projeví do tří hodin změnou barvy bakteriální suspenze, do které byl disk se substrátem ponořen. Barevná změna probíhá buď spontánně, nebo po přidání činidel.
Obsah soupravy:
Souprava obsahuje 5 následujících balení disků po 50 kusech:
1. ß -GLU - substrát pro b -glukuronidázu
2. INDOL - substrát pro tryptofanázu
3. ONPG - substrát pro b -galaktosidázu
4. TDA - substrát pro tryptofan-deaminázu
5. UREA - substrát pro ureázu
Součástí soupravy je Ehrlichovo činidlo (test INDOL) a chlorid železitý (test TDA).
Provedení testů:
1. Ve 2 ml sterilní destilované vody připravte hustou suspenzi testovaného kmene (č. 3 McFarlandovy zákalové stupnice) a suspenzi rozplňte po 0,4 ml do 5 Eppendorfových zkumavek.
2. Do zkumavek vložte disky (1disk = 1 zkumavka), dobře je uzavřete, jemně protřepejte a nechte je inkubovat 3 hod při 37 + 1°C.
3. Po inkubaci přidejte k testu INDOL jednu kapku Ehrlichova činidla a k testu TDA jednu kapku roztoku chloridu železitého (před upotřebením činidla protřepejte).
Odečítání výsledků a hodnocení:
Po inkubaci a přidání činidel sledujte barevné změny v jednotlivých zkumavkách - viz tabulka 1:
Tabulka 1
| Test | Přidaná činidla | Pozitivní | Negativní |
|---|---|---|---|
| b -GLU | - | žlutá | bezbarvá |
| INDOL | 1 kapka Ehrlichova činidla | červená (prstenec) | žlutá (prstenec) |
| ONPG | - | žlutá | bezbarvá |
| TDA | 1kapka roztoku chloridu železitého | tmavěhnědá | žlutohnědá |
| UREA | - | růžovo-fialová | žlutá |
Hodnocení proveďte podle tabulky 2. K detailní identifikaci některých druhů můžete provést několik jednoduchých doplňkových testů.
Upozornění:
1. Souprava ITEST ENTERO 3H je složena z 5 balení diagnostických disků po 50 ks a dvou činidel po 3 ml a je dodávána pod katalogovým číslem SO 321. Diagnostické disky a činidla lze také objednat jednotlivě:
b -GLU - k.č. DD 508 Ehrlichovo činidlo - k.č. PP 61
INDOL - k.č. DD 509 Chlorid železitý - k.č. PP 62
ONPG - k.č. DD 507
TDA - k.č. DD 510
UREA - k.č. DD 511
Eppendorfovy zkumavky nejsou součástí soupravy. Je možné jejich dodatečné přiobjednání.
2. Souprava ITEST ENTERO 3H je určena pouze pro použití in vitro.
3. Disky a činidla uchovávejte v temnu při 2 – 8°C a spotřebujte do doby exspirace uvedené na štítku.
4. Při poškození primárního obalu IVD nepoužívejte a kontaktujte výrobce.
5. Nespotřebovaný IVD a prázdný obal likvidujte v souladu se zákonem o odpadech č. 185/2001 Sb.
Tabulka 2
| b -GLU | INDOL | ONPG | TDA | UREA | Druh | Doplňkový test |
|---|---|---|---|---|---|---|
| + | + | + | - | - | E. coli | |
| - | + | + | - | - | C.diversus E.coli(15%) | Citrat+ Citrát- |
| - | - | - | + | + | P. mirabilis | |
| - | - | + | - | + | K. pneumoniae | Pohyblivost - |
| - | + | + | - | + | K. oxytoca | Pohyblivost - |
| - | + | - | + | + | P. vulgarisM. morganii
Prov. rettgeri |
H2S +ORN +
ORN - |
| - | + | - | + | - | Prov. stuartiiProv. alcali-faciens | Inositol +Inositol - |
| + | + | + | - | ++ | Y. enterocoliti-ca (typ 1–2) | |
| - | - | + | - | ++ | Y. enterocoliti-ca (typ 3–4)Y. pseudotuber-culosis | |
| - | - | + | - | - | S. marcescensEnt. aerogenes
Ent. cloacae C. freundii Hafnia alvei |
VP LYZ ORN ARG Ci Rh + + + – + -
+ + + – + + + – + + + + - – – – v + d + + – – + |
| V | - | - | - | - | Salmonella sp.Shigella (50%) | Pohyblivost +Pohyblivost - |
| V | + | - | - | - | Shigella (50%) E. coli (5%) | Pohyblivost -LYZ, Citrát + |
| + | - | + | - | - | Sh. Sonnei | Pohyblivost - |
VP - Voges-Proskauerův test, LYZ - dekarboxylace L-lyzinu, Ci - citrát, ORN - dekarboxylace L-ornitinu, ARG - dekarboxylace argininu, v - variabilní, d - variabilní při různé teplotě, Rh - fermentace ramnózy.