DD 601 Nystatin 50µg, DD 602 Amfotericin B 50µg, DD 603 Pimaricin 50µg, DD 604 5-Fluorocytosin 5µg, DD 605 Itrakonazol 30µg, DD 606 Ketokonazol 30µg, DD 607 Klotrimazol 30µg, DD 608 Mikonazol 30µg, DD 609 Flukonazol 25µg, DD 610 Ekonazol 30µg, DD 611 Bifonazol 30µg, DD 612 Ciklopiroxolamin 30µg
Význam a použití:
Antimykotické disky jsou určeny ke stanovení citlivosti mikroskopických hub k antimykotikům v podmínkách in vitro. Pomocí jednoduché difúzní metody lze již po 18-24 hod získat informace o aktuální citlivosti testovaného houbového izolátu. Výsledky antimykotického antibiogramu umožňují zahájení racionální léčby mykotické infekce.
Provedení testu:
Ve fyziologickém roztoku připravte suspenzi testovaného kmene (0,5 stupně McFarlandovy zákalové stupnice) a touto suspenzí přelijte povrch agarové plotny v petriho misce. Zbytek suspenze odsajte a po jejím zaschnutí (asi 15 min při laboratorní teplotě) přiložte sterilně antimykotické disky. Inkubujte 18-48 hod při 37˚C.
Hodnocení testu:
Po inkubaci sledujte přítomnost a případně velikost inhibičních zón kolem antimykotických disků.
Pro polyenová antibiotika u in vitro citlivých kmenů je charakteristická přítomnost jasné, ostře ohraničené inhibiční zóny, obvykle malého průměru (amfotericin B a pimaricin >10 mm, nystatin >15 mm).
Pro azoly (klotrimazol, mikonazol, ekonazol, bifonazol, ketokonazol, itrakonazol, flukonazol a vorikonazol), 5-Fluorocytosin a Ciklopiroxolamin je charakteristická inhibiční zóna většinou s neostrými hranicemi a patrným nárůstem testovaného kmene uvnitř inhibiční zóny i u citlivých kmenů in vitro.
Velikost inhibiční zóny u citlivých kmenů je následující:
5-Fluorocytosin, klotrimazol, mikonazol, ekonazol, ketokonazol > 20 mm, bifonazol, itrakonazol a ciklopiroxolamin >10 mm, flukonazol >15 mm, vorikonazol > 17 mm.
Poznámka:
Pro testování doporučujeme modifikovaný Sabouraudův glukózový agar (2% glukóza, 1% pepton, 2,5% agar, pH neupraveno). Pro azolová chemoterapeutika (ale ne 5-Fluorocytosin!) může být použit agar s kasitonem (1,9% Casitone Difco, 1% Yeast extract Difco, 2% glukóza, 1% citrát sodný, 0,1% hydrogenfosforečnan sodný, 2,5% agar, pH 6,6) nebo komerční půda Antimycotic sensitivity test agar firmy Hi-Media.
Upozornění:
1. Antimykotické disky jsou dodávány v balení po 50 nebo 100 ks a jsou určeny pouze pro použití in vitro.
2. Disky uchovávejte v temnu při teplotě 2 – 8°C a spotřebujte do doby exspirace uvedené na štítku.
3. Při poškození primárního obalu IVD nepoužívejte a kontaktujte výrobce.
4. Nespotřebovaný IVD a prázdný obal likvidujte v souladu se zákonem o odpadech č. 185/2001 Sb.